沈泓++李珏++孙晗
摘 要：检测报告的质量直接影响客户对报告的理解和使用，在微生物领域，除了做好检测过程的质量控制和保证外，也应重视对结果报告的质量保证工作。本文在微生物检测结果的表示、评定和不确定度的應用三方面进行探讨。
关键词：微生物检测；不确定度；结果评定
中图分类号：TS207.4 文献标识码：A 文章编号：1671-2064（2017）20-0235-01
检测报告的质量直接影响客户对报告的理解和使用，在微生物领域，除了做好检测过程的质量控制和保证外，也应重视对结果报告的质量保证工作。
1 微生物检测结果的表示
在微生物检验实验室结果的表示中，菌落计数、MPN值和定性结果表示方式不同。
菌落计数结果表示：通常用菌落形成单位CFU（colony forming unit）表示菌落计数结果，如：“CFU/g”（一般是固体样品），“CFU/mL”（一般是液体样品），“CFU/cm2”（表面积取样法时）和“CFU/双”（如加工人员的手）等，也有用“个/g”，“个/mL”表示。菌落计数数字的表示需要符合相关标准的具体要求。如GB 4789.2-2016对菌落总数报告的要求为：菌落数小于100 CFU时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告。菌落数大于或等于100 CFU时，第3位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2位数字，后面用0代替位数。也可用10的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约。如：20532CFU/g修约为21000CFU/g，也可用2.1×104CFU/g来表示。
MPN值结果表示：有一些细菌检测结果用最大可能值MPN（Most Probable Number）表示，如：“MPN/g”，“MPN/mL”，“MPN/100g”和“MPN/100mL”等。MPN是表示样品中活菌密度的估算值，并不是样品中活菌数的真值。MPN计数法是基于泊松分布的一种间接计数方法，适用于测定混杂微生物群落中含量较低的微生物。通过确证的阳性管数，检索MPN表来获得检验微生物的最可能数（MPN）。MPN值可以根据稀释度检样量的不同，对表内数字进行相应得降低或增加。
定性检测结果的表示：在微生物检验实验室中，一种常见的结果表示方式是对定性检测结果的报告。如：“阴性或阳性”，“检出或未检出”。在定性结果表示时有时会标注取样量，如“阴性或阳性/25g”，“阴性或阳性/100g”等。定性检测的目标需要明确，如根据GB 4789.42检测结果报告“检出诺如病毒基因”或“未检出诺如病毒基因”。
2 微生物检测结果的评定
根据微生物学指标值或限量值对检测结果进行判定，还应考虑抽样方法，以及评定的范围，是对某一样品进行评定，还是对整批产品进行评定。国际食品微生物标准委员会（The International Committee on Microbiological Specification for Food，ICMSF）制定的食品微生物学分析采样方法，我国目前也逐渐采纳了与国际接轨的ICMSF采样方案。ICMSF提出的采样基本原则，根据各种微生物本身对人的危害程度各有不同和食品经不同条件处理后，其危害度变化情况来设定抽样方案并规定其不同采样数。ICMSF方法是从统计学角度，依据一批产品检查多少个检样才能够有代表性，才能客观地反映该批产品的质量的原则，其抽样方法包括二级法和三级法。二级法设有n、c和m值，三级法设有n、c、m和M值。GB 4789.1-2016对其有明确解释：
n：同一批次产品应采集的样品件数；
c：最大可允许超出m 值的样品数；
m：微生物指标可接受水平限量值（三级采样方案）或最高安全限量值（二级采样方案）；
M：微生物指标的最高安全限量值。
注1：按照二级采样方案设定的指标，在n个样品中，允许有≤c个样品其相应微生物指标检验值大于m值。
注2：按照三级采样方案设定的指标，在n个样品中，允许全部样品中相应微生物指标检验值小于或等于m值；允许有≤c个样品其相应微生物指标检验值在m值和M值之间；不允许有样品相应微生物指标检验值大于M值。
如GB10765-2010中对婴儿配方食品中的阪崎肠杆菌采用二级采样的方案，其限度为n=3，c=0，m=0/100g，即抽样的3个样品中均不能检出该致病菌。而对大肠菌群的检验采用的是三级抽样的方案，其限度为n=5，c=2，m=10，M=100。
因为二级采样对致病菌“零容忍”，对阪崎肠杆菌的检验可以看作是定性检验，直接报告结果为“检出”或“未检出”，有任何1个样品检出，则该批次乳粉不合格。
对大肠菌群的检验可以分为以下几种情况：若5个样品大肠菌群数均≤10CFU/g，则该批次产品合格；若≤2个样品大肠菌群数在10CFU/g-100CFU/g，则该批次产品合格；若有3个样品大肠菌群数>10CFU/g，则该批次乳粉全部不合格.若有任何1个样品大肠菌群数>100CFU/g，则该批次乳粉都不合格。
对于固体样品，若平板计数法的培养计算结果为5，低于检出限，应以小于检出限数值报告，即为<10CFU/g。
3 不确定度的应用
当不确定度与检测结果的有效性或应用有关，或客户的指令中有要求，或不确定度影响到与规范限度的符合性时，则检测报告中还需要有关不确定度的信息。测量不确定度是表征合理地赋予被测量之值的分散性、与测量结果相联系的参数。测量不确定度不能用于被测量值的修正，它可以表征被测量值的合理范围。
在APLAC TC 005：2004中指出在对微生物测量不确定度评定方面，微生物测试有四种主要类型：常规定量测试、MPN法、定性测试和专家测试如医药测试等。各种不确定度的评定方法是用于常规定量测试的。
在CNAS-CL09：2013中指出在微生物检测领域，某些情况下，一些检测无法从计量学和统计学角度对测量不确定度进行有效而严格的评估，这时至少应通过分析方法，考虑它们对于检测结果的重要性，列出各主要的不确定度分量，并作出合理的评估。有时在重复性和重现性数据的基础上估算不确定度也是合适的。
最简单的情况是规范本身清楚地说明测得值在给定的置信水平下的不确定度扩展后不应超出规定的限值或在规定的限定值内。
在多数情况下，规范要求在证书或报告中做出符合性声明，但没有指明进行符合性评价时需考虑不确定度的影响。在这种情况下，可以在不考虑不确定度的情况下，根据测得值是否在规定限制范围内做出符合性判断。
在客户与实验室之间的协议或实施准则或规范中可能已声明其采用方法的准确性是足够的，且在判断符合性时，可以忽略不确定度。
当没有相应的准则、测试规范、客户要求、协议或实施规则时，可采用下列方法：
（1）当测得值以95%的置信水平延伸扩展不确定度时仍不超过规定限值时，则可以声明符合规范要求。
（2）如果测得值向下延伸扩展不确定度后，仍超出规定限值的上限，则可以声明不符合规范要求。
（3）如果测得值向上延伸扩展不确定度后仍低于规定限值的下限，则可以声明不符合规范要求。
（4）在不可能测试同一个产品单元的多个样品，或不可能进行重复测试的情况下，测得的单一值若非常接近规定限值，延伸扩展不确定度后高于上限或低于下限，这时在规定的置信水平上不能确定是否符合规范。应当报告测得值与扩展不确定度，并声明无法证实符合或不符合规范。
如果可以对同一产品单元的两个或多个样品进行测试，或可以对同一样品进行重复测试，或可以对留样进行重复测试，则建议做重复测试。估算出对同一样品所有测得值的平均值或所有重复测试的平均值和该平均值的不确定度，然后做出相应的判断。
（5）如果测得值恰好为规定限值，则在指定的置信度水平上不可能做出是否符合规范的声明。应当报告测得值与扩展不确定度，并说明在指定的置信度水平上无法证实符合或是不符合规范。endprint
